白蜡直接诱导促进丛生芽大量产生植株

  1.外植体的建立

  (1)外馆体的选取

  白蜡组织培养的外植体,一般分为两类。一类是带芽的外橙体,如茎尖、例芽、鳞芽、原球茎等组织培养过程中可直接诱导促进丛生芽的大量产生,其获得再生植株的成功率较高,变异性也较小,易于保持材料的优良性状;白蜡另一类主要为根、茎、叶等营养器官及花药、花藩、花托、胚珠、果实等生殖器官,这类白蜡外植体大都需要一个脱分化过程,经过愈伤组织阶段再分化出芽或产生胚珠状体。然后形成再生植株。

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  在快速白蜡繁殖上,履常用的外检体是茎尖。遏常切块在o.5叨左右,太小产生愈伤组织的e8力较弱,太大则在培养器皿中占空间太多。此外如果为培养无病毒苗而采用的外植体则通常仅取茎尖分生组织部分其长度常在0.1mm以下。

  (2)外植体的消毒

  由于外核体大都采用外界生长的植株,常带有各种微生物,如带入培养6,会迅速露殖而形成污染,导致培养工作的失败。因此,外检体消毒是必不可少的工作,消毒既要杀灭外植体上的病菌,又不能伤害材料而影响其生长。由于材料不同,栽培条件、季节等不同,外植体消毒应选用各自合适的

  消毒剂种类、消毒剂浓度、消毒时间及处理程序。

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  白蜡理想的消毒剂应有较强的杀菌能力,并应具有易去除而不易伤害外植体的特点。常见的如次氯酸钠(O.5%一10%)和漂白杨(1%一10%)滤液能分解产生具杀菌作用的氯气,并自行散发到空气中,只要浓度得当,不易伤害外植体。双氧水(3%一10%)也易分解散失而不易伤害外植体。酒糟(70%)具较强的渗透力和杀茵作用,且易散发,但会杀死组织纫胞,所以消毒时间不宜过长。常先用酒精消毒几秒钟,。再用其他消毒剂处理,有利消毒剂渗入材料发挥系茵作用。

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  一般消毒方法和程序因材料等的差异而不同,常用的如:①先用酒精(70%)浸数秒,取出后故人氯化汞(O.1%)中,视材料幼嫩程度没1-8m吨再用无菌水冲洗3-5次;或②先用酒精[70%)涅数秒,白蜡取出后置10%次氯酸钙饱和上演液浸10一20min或2%一10%次氯酿钠溶液涅6-15m小取出后用无茵水冲洗3次。

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